原创《五味子、百部提取物消除耐环丙沙星大肠杆菌耐药性》：关于免费大肠杆菌论文范文在这里免费下载与阅读,为您的大肠杆菌相关论文写作提供资料。
摘 要：采用影印培养法,以浓度为1/2MIC的五味子水煎液、五味子醇提物、百部水煎液、百部醇提物对耐环丙沙星大肠杆菌作用24 h,观察作用前后大肠杆菌对环丙沙星的耐药性变化.结果表明：五味子水煎液、五味子醇提物、百部水煎液、百部醇提物对临床分离耐药菌株均无明显耐药性消除作用,五味子水煎液、五味子醇提物对人工诱导耐药菌株有一定的耐药消除作用.
关键词：大肠杆菌；五味子；百部；耐药消除；环丙沙星
中图分类号：S853.74文献标识号：A文章编号：1001-4942（2016）08-0134-03
AbstractThe tolerance of Escherichia coli to ciprofloxacin was observed after treated with 1/2MIC of Chinese Magnolcavine Fruit and Stemonae Radix extracts using replica plating. The extracts were obtained through decocted by water and ethanol respectively. The results showed that the Chinese Magnolcavine Fruit and Stemonae Radix extracts had no significant eliminating effects on drug tolerance of clinical isolates of E. coli, but the decocted and ethanol extracts of Chinese Magnolcavine Fruit had elimating effects of artificial induced drug-resistant strains in some extent.
KeywordsEscherichia coli；Chinese Magnolcavine Fruit；Stemonae Radix； Eliminating drug tolerance；Ciprofloxacin
随着抗生素越来越广泛应用于临床治疗大肠杆菌病,临床上出现了更多的大肠杆菌耐药菌株,使得很多抗生素失去了原有的治疗效果[1].目前,人们在努力发现新抗生素的同时,也在寻求消除细菌耐药性的方法[2].国内亦有人开展了中药消除细菌耐药性的研究.鞠洪涛[3]报道大蒜油对大肠杆菌氨苄青霉素耐药性有消除作用；王云等[4]用马齿苋、金银花提取液对绿脓杆菌PA11株R质粒进行体内消除研究,结果显示两种药作用24 h均未获得消除作用,作用48 h和72 h R质粒平均消除率马齿苋为2.15%、金银花为12.25%；康梅等[5]用三黄片对大肠杆菌多重耐药株进行质粒消除试验,发现三黄片对耐药质粒有较强的消除作用；陈群等[6]在用黄芩和止痢灵对大肠杆菌R质粒消除作用的研究中发现黄芩和止痢灵对大肠杆菌携带的R质粒具有消除作用,其消除率为2.42%和2.14%；雷连成等[7]发现黄连提取物 （IT2）对大肠杆菌的部分耐药性具有良好的抑制作用.
然而,关于中药消除细菌耐药性的研究尚处于探索阶段,目前人们仍在致力于发现更多更有效的对宿主本身无害的能消除细菌耐药性的中药制剂.本试验选择五味子及百部不同提取物来消除自然的和人工诱导的大肠杆菌耐药性,以期为筛选有效中药消除剂提供基础.
1材料和方法
1.1材料和仪器
1.1.1试验菌株本试验所用大肠杆菌天然耐药菌株为临床分离鉴定的鸡源大肠杆菌耐环丙沙星菌株,由山东省农业科学院家禽研究所提供.用于进行人工诱导耐药菌株为标准菌株CMCC44102,购自中国兽医药品监察所.
1.1.2试验药物环丙沙星药敏片购自杭州天和微生物试剂有限公司；环丙沙星标准品购自中国药品生物制品检定所；五味子、百部均购自山东建联中药店.
1.1.3试验试剂营养琼脂培养基购自北京奥博星生物技术有限公司；LB培养基购自OXOID公司.
1.1.4试验仪器pH测定仪、高压锅、电子天平、电炉、超净工作台、酒精灯、恒温培养箱、冰箱.
1.2试验方法
1.2.1试验菌株准备①菌株活化：吸取冻存菌株10 μL放入4 mL LB液体培养基中,37℃振荡培养18 h,再将培养液用无菌生理盐水稀释至0.5麦氏比浊管浑浊度,即菌液浓度为3×108 CFU/mL,按照标准方法将其再稀释1 000倍用于测定环丙沙星标准品溶液的MIC.
②临床分离的天然耐药菌株的耐药性检测：采用K-B法测定试验菌株对环丙沙星的耐药性,观察含药纸片周围有无抑菌圈,并测量抑菌圈直径.采用试管二倍稀释法,以400 μg/mL环丙沙星水溶液为首浓度,倍比稀释至0.78125 μg/mL,测定环丙沙星对试验菌株的MIC.
③标准菌株的人工耐药诱导：采用肉汤稀释法,以10 μg/mL环丙沙星水溶液为首浓度倍比稀释至0.01953 μg/mL,测定环丙沙星对标准菌株的MIC.以1/2MIC作为诱导耐药浓度,然后逐步增加药物浓度使其耐药浓度达到10 μg/mL.
1.2.2中药提取物的制备①水煎液的制备：取五味子、百部各100 g,加入十倍量蒸馏水浸泡0.5 h,煎煮1.0 h,过九号药典筛,然后再加入十倍量蒸馏水煎煮1.0 h,过九号药典筛,合并滤液,浓缩至每1 mL含生药1 g,高压灭菌后4℃保存备用.
②醇提物的制备：取五味子、百部各100 g,加入十倍量80%乙醇浸泡0.5 h,加热回流提取1.0 h,过九号药典筛.向药渣中再加入十倍量80%乙醇,将以上过程重复1次,合并滤液.45℃旋蒸去除乙醇,浓缩至每1 mL含生药1 g,高压灭菌后4℃保存备用.
大肠杆菌论文参考资料：
结论：五味子、百部提取物消除耐环丙沙星大肠杆菌耐药性为关于本文可作为相关专业大肠杆菌论文写作研究的大学硕士与本科毕业论文鸡大肠杆菌特效药论文开题报告范文和职称论文参考文献资料。
