原创《高效液相色谱法快速测定食品中脱氢乙酸》：这是一篇与脱氢乙酸论文范文相关的免费优秀学术论文范文资料,为你的论文写作提供参考。
摘 要：本文采用乙腈提取食品中脱氢乙酸,注入高效液相色谱进行测定,以保留时间定性,采用外标法定量.本方法的线性方程有良好的相关性,R等于0.9997.方法加标回收率为96.2%～99.6%,变异系数RSD值为1.09%.该方法操作简便、准确,回收率高,精密度良好,重现性好,可用于食品中脱氢乙酸的测定.
关键词：高效液相色谱法 脱氢乙酸 食品检测
脱氢乙酸具有较强抑制细菌、霉菌及酵母菌发酵的作用,尤其对霉菌的抑制作用最强,是一种高效的防霉、防腐剂.其还具有脂溶性强、热稳定性高的特点,在摄氏120℃的杀菌温度下仍保持杀菌能力不变.国外曾广泛使用于食品、药品中,我国自上世纪70年代中其开始用于食品防腐,曾用于果汁、酱菜、腐乳、干酪、人造奶油、乳酸菌饮料、月饼、果酱等食品.脱氢乙酸的缺点是毒性较强,目前我国允许在腐乳、酱菜、果蔬汁、肉类制品、糕点、月饼、焙烤馅料中作为防腐剂使用,最大使用量0.5克/公斤.脱氢乙酸的国标检测方法为气相色谱法,样品经过有机溶剂的萃取、净化、浓缩等步骤的复杂处理,并且脱氢乙酸在气相色谱条件下色谱峰出现拖尾现象,使定性、定量影响较大.据报道利用高效液相色谱法食品中脱氢乙酸,采用纯水、乙醇-水、碱性水对样品进行超声萃取处理,萃取液经过滤后上机检测.作者在试验中发现,利用脱氢乙酸难溶于水而易溶于甲醇、乙醇、乙腈等有机溶剂的特性,样品均浆后酸化处理,用乙腈提取,经微孔过滤后用高效液相色谱进行定性、定量测定,方法的灵敏度、准确度和回收率高,精密度良好,重现性好,前处理简便快捷,更能满足样品分析要求.
一、材料和方法
(一)仪器
Waters公司的高效液相色谱仪,1525泵,2486检测器,717自动进样器,BREEZ色谱管理软件；Waters C18 5um,4.6 mm X 250 mm色谱柱.旋涡混合器,离心机TGL-10B,MILLI-Q,超纯水机.
(二)试剂
乙腈 色谱纯
乙酸铵 分析纯
氯化钠 分析纯
脱氢乙酸,纯度99.9%（日本生产）
(三)测定方法
1.色谱条件
流动相 乙腈—0.02mol / ml乙酸铵溶液（15+85）
流速 1.0 ml / min
温度 35℃
进样量 10 μl
2.实验方法
实验样品材料用一般市售的果汁、酱菜、腐乳、糕点等食品.果汁样品精确称取5.00 g于50 ml的离心管中；酱菜、腐乳、糕点等食品样品事先均匀,准确称取2.0～3.0 g于50ml的离心管中,加入5mL饱和氯化钠溶液和1ml盐酸溶液（1 ：1）,用旋涡混合器混合1分钟,准确加入10mL乙腈,用旋涡混合器混合3分钟,3000转离心15分钟,取上清液经0.45μm过滤器过滤后供液相色谱测定.
3.色谱分析
按1.3.1色谱条件对样液进行分析,采用外标法,以保留时间定性,以峰面积定量,测定样液中脱氢乙酸的浓度（mg/ml）.
二、结果和讨论
(一)检测波长的确定
根据扫描的结果,脱氢乙酸的最大吸收波长在230 nm和297 nm处,230 nm处吸收较强,但基体于扰较多,在波长297NM处基体干扰较少,故选取检测波长297NM.
(二)流动相的选择
流动相为乙腈+水时,脱氢乙酸峰形拖尾,使用0.02 mol / L的乙酸铵代替水作流动相,峰形得到较大的改善.乙腈的比例影响出峰的时间和响应,乙腈的比例低,保留时间长,响应也会低,乙腈比例高时,出峰时间短,响应也较高.试验表明,当0.02 mol / L的乙酸铵—乙腈比例为85：15时效果较好.
(三)提取液的选择
脱氢乙酸难溶于水,易溶于苯、氯仿、 .脱氢乙酸钠则易溶于水,选用水或氢氧化钠溶液、碳酸钠溶液提取,提取液须净化后方可使用.本方法选用乙腈作提取液,主要考虑到脱氢乙酸能溶液于乙腈,乙腈的水溶性有利于乙腈从酸性的样液中把脱氢乙酸完全溶解,同时乙腈可沉淀蛋白质,和脂肪不溶,离心分离得到干净的提取液.
(四)色谱分离
在1.3.1色谱条件下测定,脱氢乙酸的保留时间为5.775min,峰形及组分分离效果好,色谱图见图1.
图1脱氢乙酸色谱图
(五)标准曲线
以70%乙腈水溶液为溶剂配制浓度0.01～0.1范围内的脱氢乙酸标准使用液,测定结果见表1.以峰面积对脱氢乙酸浓度进行回归分析得回归方程式Y等于2.39X×108–1.33×105,R等于 0.9997,线性良好.在对同一浓度标样连续进样5次,得到脱氢乙酸的峰面积和保留时间的RSD值分别为0.35%和0.24,方法的定性和定量准确度较高.
表1 脱氢乙酸标准系列测定结果
(六)方法的回收率和精密度试验
称取不含脱氢乙酸的腐乳3g样品3份,分别加入0.1mg、0.2mg、0.4mg、0.6mg、1.0mg脱氢乙酸标样,按1.3.2、1.3.3和1.3.4步骤处理测定,经计算,加标回收率为96.2%～99.6%,平均回收率为98.6%.
选择添加有脱氢乙酸的腐乳样品,按按1.3.2、1.3.3和1.3.4步骤对同一样品分别做6次平衡测定,测定结果值分别为0.193、0.196、0.195、0.199、0.196和0.194g/kg,测得标准偏差2.14×103,变异系数RSD值为1.09%.
（七）样品测定
应用本方法对市售产品果汁、酱菜、腐乳、月饼中脱氢乙酸含量量的测定,结果详见表2.
表2 市售样品中脱氢乙酸测定结果
参考文献：
[1]陈小平,龚劭刚.脱氢乙酸的合成和应用[J].化工时刊,2005,19（4）：7～8
[2]骆萌.脱氢乙酸及相关化合物生产技术[J].化工中间体,2004,1（7）：31～33
脱氢乙酸论文参考资料：
结论：高效液相色谱法快速测定食品中脱氢乙酸为大学硕士与本科脱氢乙酸毕业论文开题报告范文和相关优秀学术职称论文参考文献资料下载，关于免费教你怎么写脱氢乙酸钠对人有害吗方面论文范文。
