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关于外植体论文范文资料 与珙桐外植体选材组织快繁启动有关论文参考文献

版权:原创标记原创 主题:外植体范文 科目:论文范文 2024-03-23

《珙桐外植体选材组织快繁启动》:本论文主要论述了外植体论文范文相关的参考文献,对您的论文写作有参考作用。

摘 要:珙桐(Davidia involucrata)是一种濒危的孑遗植物,由于其花形优美,在园林绿化中具有很大的应用价值.但珙桐种子繁殖或扦插等繁殖方式都非常困难,无论从种质保护还是经济应用的需要,开展珙桐的快速繁殖组织培养技术研究都十分重要.本研究对珙桐组织培养的外植体选择、消毒液升汞的不同浓度和基本培养基进行了详细研究.结果表明,选择春季的鳞芽及半木质化的带芽枝条效果较好,75%的酒精消毒10 s及0.1%升汞消毒10min基 达到要求,而基本培养基以WPM培养基效果最好.研究结果构建了珙桐的以芽繁芽技术体系,但组培苗的生根需要进一步研究.

关键词:珙桐组织培养;外植体选择;外植体消毒;WPM培养基

中图分类号:S688.2 文献标志码:A 论文编号:cjas15030023

0引言

珙桐(Davidia involucra)是第三纪孑遗植物,同时其开花的时候,花色雪白、花形犹如展翅飞翔的鸽子,所以又叫鸽子树.但是现在这个物种面临灭绝.对这个物种通过组织培养方法进行快速繁殖是恢复其生态种群的重要途径之一.同时各地绿化工程也在广泛地将珙桐作为行道树进行栽培,需求量巨大.由于珙桐具有极高的园林绿化价值,对珙桐进行组织快繁将产生巨大的经济效益.

由于珙桐是一种高大的乔木,对大多数未经驯化的木本植物的组培都还存在一定的技术难度.主要是外植体的选材、消毒、褐变等问题不能很好解决.就珙桐而言,目前处于濒危状态,种子构造类似黑桃.最外层有一层果肉,果肉会自然干腐,但不会自行脱落,在果肉和种仁之间是一层厚厚的坚硬外壳,种子内部还有大量的败育情况,去掉种子外壳后无种仁的情况至少有1/3,所以通过种子繁殖的时候出苗率极其低下.珙桐还具有二次休眠,休眠时间最长达3年之久.要大面积恢复珙桐的生态种群,完全靠自然的种子繁殖将会存在较大的问题.国内外虽然有部分资料表明对珙桐进行了组培快繁,但效果都极其有限.所以对珙桐的组培快繁仍然处于尝试阶段.我们主要是针对外植体选材、消毒、抗褐变等进行了初步研究,希望能建立一套高效的快速繁育体系.

1材料和方法

1.1试验时间、地点

本研究仅进行了室内组织培养实验研究工作.实验在安康学院化学化工系隶属的陕西省安康GAP工程技术研究中心的药用植物组织培养实验室完成了所有研究工作.

1.2试验材料

珙桐外植体选自2006年从陕西镇坪移栽到安康学院校内花园的植株及原安康市科技局家属院花园的植株.取材时间2014年3—10月.

外植体分别选取大树嫩枝、从大树旁边地上长出来的嫩枝、初春冬芽、秋季形成的冬芽做单因素消毒核繁殖启动试验.

1.3试验方法

1.3.1试验设计 对基本培养基进行了单因素设计实验,处理A为MS全量、处理B为1/2MS、处理C为WPM全量,其他成分均为添加2 mg/L 6-BA+0.1 mg/LNAA+40 g/L蔗糖+8 g/L琼脂粉,区组重复3次,一次做完所有处理为一个区组,每个处理重复25个350 mL培养瓶,每个培养瓶内含25 mL固体培养基.

对外植体的研究也是单因素室内随机区组试验,设置水平分别为大树幼芽、从大树旁边地里长出的幼枝、初春冬芽和秋季形成芽.重复方式同上.

消毒方法试验一样采用单因素随机区组法,处理水平为升汞(HgCl2)浓度梯度为0.01%、0.05%、0.1%及0.15%处理.消毒程序均为自来水反复清洗,随后75%酒精消毒10 s,然后进行不同浓度的升汞消毒试验.升汞消毒时间均为10 min.重复方式同上.

培养基的配制方法参见文献.

启动的标准为培养1个月时观察幼芽萌发超过1 cm.污染率记为培养1个月时瓶子内有杂菌菌落或者培养基表面有培养物之外的其他生物.

1.3.2精密仪器和药品规格 研究所用组培设备都是常用设备.包括上海博迅实业有限公司生产的YXQ-LS-75SII型高压灭菌锅、BOXUN SPX-300IC型微电脑人工气候箱和SW-CJ-2FD型洁净等级100级的超净工作台.大龙兴创实验仪器(北京)有限公司生产的1000~5000μL和100~1000μLDragonLAB移液枪.深圳市柯迪达电子有限公司生产的CT-6321型pH(笔式)酸度计.

1.3.3统计分析所有数据统计分析都是采用的微软的Excel电子表格和SPSS处理和计算.统计显著水平均取5%.

2结果和分析

2.1外植体选择试验

试验应用多种方式进行选材,试材主要有大树嫩枝、从大树旁边地上长出来的嫩枝、初春冬芽和秋季形成的冬芽.试验结果参见图1.

从图1可以看出,大树幼芽和秋季冬芽的萌发率低污染率高,不是理想的组织培养外植体.从大树旁边地上生长出来的幼芽和初春冬芽的萌发率高,而污染相对较少.而未启动的比率四者差异不是太大.主要问题还是集中在污染上.

2.2消毒试验

外植体从田间采集下来之后,装于黑色干净的塑料袋中经过小于2 km的运输带回实验室.将外植体剪切成单芽的小段,断头在酒精灯上烧干封闭,以防止褐变.随后用自来水进行反复冲洗并用毛刷对表面及鳞芽附近角落进行了反复刷洗.之后室温晾干1~2 h.然后再进入酒精消毒和升汞消毒程序.对升汞消毒程序进行了优化.优化结果参见图2.

152不同升汞浓度消毒优化试验结果

从图2看出在0.01%和0.05%的低浓度升汞消毒结果中,几乎没有大的差异,污染率都很高.而在0.15%的高浓度处理中虽然没有污染,但是材料也基本杀死了.所以最适宜升汞浓度为0.1%.

2.3培养基及激素配比试验

外植体论文参考资料:

结论:珙桐外植体选材组织快繁启动为关于本文可作为相关专业外植体论文写作研究的大学硕士与本科毕业论文植物细胞全能性论文开题报告范文和职称论文参考文献资料。

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