原创《反相高效液相色谱法测定利伐沙班原料药含量》：本论文可用于沙班论文范文参考下载，沙班相关论文写作参考研究。
[摘 要] 目的 建立反相高效液相色谱法测定利伐沙班的含量.方法 色谱柱为ZORBAX SB-C18（4.6×150 mm,5 um）；以乙腈-水（40：60）为流动相；流速1.0 mL/min,检测波长为250 nm.结果 利伐沙班在浓度为10.15～30.45 μg/mL范围内和峰面积的线性关系良好（r等于0.999 9,n等于5）,平均回收率为99.64%（RSD为0.16%,n等于9）. 结论 方法准确度、精密度良好,适用于利伐沙班的含量测定.
[关键词] 高效液相色谱法；利伐沙班；含量
[中图分类号] R7 [文献标识码] A [文章编号] 1672-5654（2017）06（b）-0041-02
[Abstract] Objective To establish the reversed phase high-performance liquid chromatography in measuring the content of rivastopharan raw drug. Methods Chromatographic column was ZORBAX SB-C18（4.6×150 mm,5 um）, and acetonitrile/water（40：60）was the mobile phase and the velocity was 1.0 mL/min,and the test wavelength was 250 nm. Results The concentration of rivastopharan had a good liner correlation with peak area in 10.15～0.45 μg/mL,（r等于0.999 9,n等于5）, and the average recycle rate was 99.64%（RSD,0.16%,n等于9）. Conclusion The accuracy of the method is good with good precision, which is suitable for the content measurement of rivastopharan.
[Key words] High-performance liquid chromatography； Rivastopharan； Content
抗凝药物在预防血栓中发挥重要作用,但传统的抗凝药物如肝素需胃肠道外给药,院外使用不便.口服抗凝药如华法林治疗窗窄,需经常监测凝血酶原时间,给患者使用带来不便.新型口服抗凝剂利伐沙班（rivaroxaban）是直接Xa因子抑制剂,具有使用方便、无需监测的优点[1].利伐沙班对Xa因子具有高度的选择性,用于髋或膝关节置换术后静脉血栓栓塞症的预防,体内活性和生物利用度极好,具有良好的应用前景[2-3].为了保证药品的有效性,现对自制的利伐沙班原料药的含量测定方法进行研究,建立了高效液相色谱法（HPLC）测定利伐沙班的含量.方法简便、快速,准确度、精密度良好,适用于利伐沙班的质量控制.
1 仪器和试药
岛津LC-2010AHT色谱仪,安捷伦1260Bin Pump VLb泵,安捷伦1260DVD VL检测器,Agilent色谱工作站,乙腈为色谱纯,水为双蒸水,利伐沙班（自制,批号为20140801、20140901、20140902）,利伐沙班对照品（MedChem Express,批号为03201）.
2 方法和结果
2.1 溶液的配制
取利伐沙班供试品适量,精密称定,加乙腈超声溶解并稀释制成约含利伐沙班20 μg/mL的溶液,作为供试品溶液；另取利伐沙班对照品适量,精密称定,加乙腈超声溶解并稀释制成约含利伐沙班20 μg/mL的溶液,作为对照品溶液.精密量取上述两种溶液各20 μL,分别注入液相色谱仪,记录色谱图,按外标法以峰面积计算,即得.
2.2 色譜条件和系统适用性试验
色谱柱为ZORBAX SB-C18（4.6×150 mm,5 um）；以乙腈-水（40：60）为流动相；检测波长为250 nm；柱温：30℃；流速1.0 mL/min.精密量取2.1项下供试品溶液、对照品溶液及空白溶剂各20 μL注入液相色谱仪,记录色谱图,结果见图1.理论塔板数按利伐沙班主峰计算为2 800,利伐沙班主峰的拖尾因子为1.02,空白溶剂不干扰利伐沙班的含量测定,色谱条件满足系统适用性试验要求.
2.3 进样精密度
取2.1项下的对照品溶液20 μL注入液相色谱仪,连续进样6次测定,结果各色谱峰面积的RSD为0.69%.表明方法的进样精密度良好.
2.4 线性关系考察
取利伐沙班对照品适量,精密称定,加乙腈稀释制成每1 mL中约含利伐沙班对照125 μg的对照品储备液,分别精密量取该溶液2.0、3.0、4.0、5.0、6.0 mL于25 mL量瓶中,用乙腈稀释至刻度,摇匀,分别量取20μL注入液相色谱仪,记录色谱图,以浓度C（μg/mL）对峰面积A作标准曲线,线性回归方程为：A等于34089C+769.4,相关系数r等于0.999 9,利伐沙班在浓度为10.15～30.45 μg/mL范围内和峰面积的线性关系良好.
2.5 回收率试验
取供试品（批号为20140801,含量为99.86） 8、10、12 mg各3份,精密称定,分别加入对照品适量,用乙腈配制成约相当于供试液浓度的80%、100%、120%的溶液,分别进样测定,计算回收率.结果见表1,平均回收率为99.64%,RSD为0.16%（n等于9）.表明方法准确度良好.
2.6 重复性试验
取批号为20140801的样品6份及对照品适量,精密称定,照2.1项下的方法制备溶液.分别取20 μL注入液相色谱仪测定含量,RSD为0.10%.表明方法的重复性良好.
2.7 溶液稳定性试验
取批号为20140801的供试品溶液,分别在放置0、2、4、6、8、12后测定,结果主峰峰面积的RSD为1.24%,表明供试品溶液12 h内稳定.
2.8 样品含量测定
取3个批次的样品及对照品,照2.1项下的方法制备溶液并依法测定,以外标法按峰面积计算含量,结果3批供试品含量分别为99.86%、99.83%、99.79%.
3 讨论
精密称取利伐沙班对照品适量,分别加溶剂溶解并稀释制成中约含各对照品10 μg/mL的溶液,照分光光度法[4],于190～400 nm波长范围内扫描,利伐沙班在250 nm波长处有最大吸收,参照国家食品药品监督管理局利伐沙班片JX20080077,将利伐沙班含量测定检测波长确定为250 nm.
调整柱温（25～35℃）、流速（0.8～1.2）mL/min、乙腈-水比例[（38：62）～（42：58）]及色谱柱[ZORBAX SB-C18（4.6×150 mm,5 um）；inertsil ODS-3（4.6×150 mm,5 um）； Symmetry Shield RP18（4.6×250 mm,5 um）]进行试验,色谱条件仍然满足系统适用性要求,说明方法耐用性良好.
[参考文献]
[1] 柯永胜.新型抗凝药物直接Xa因子抑制剂利伐沙班[J].中国临床药理学和治疗学,2009,14（4）：361-367.
[2] 袁静,黄长江,张俊伟,等.利伐沙班的合成[J].中国新药杂志,2010,19（23）：2185-2187.
[3] 高娜娜,孙宏斌.利伐沙班衍生物的合成及Xa因子抑制活性[J].中国药科大学学报,2011,42（5）：392-399.
[4] 中华人民共和国国家药典委员会.中国药典（4部）[M].北京：中国医药科技出版社,2015.
（收稿日期：2017-03-11）
沙班论文参考资料：
结论：反相高效液相色谱法测定利伐沙班原料药含量为关于对不知道怎么写沙班论文范文课题研究的大学硕士、相关本科毕业论文依度沙班说明书论文开题报告范文和文献综述及职称论文的作为参考文献资料下载。
