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版权:原创标记原创 主题:现代范文 科目:学术论文 2024-01-20

《现代生物科技》:本论文可用于现代论文范文参考下载,现代相关论文写作参考研究。

一、近三年高考回眸

二、考纲解读

(一)2017年考试大纲对本部分内容的考试范围和要求

(二)2017年考试大纲对选修3模块内容的调整

对能力要求的一些表述进行调整:将“关注对科学、技术和社会发展有重大影响和意义的生物学新进展以及生物科学发展史上的重要事件”调整为“关注对科学、技术和社会发展有重大影响的、与生命科学相关的突出成就及热点问题”.

特别提醒:选修3中“基因工程的原理及技术”调整成“基因工程的原理及技术(含PCR技术)”.

三、构建知识网络图

四、高频考点精析

(一)基因工程及其安全性

1.提取目的基因的常用方法

2.目的基因导入受体细胞的常用方法

3.目的基因的检测与鉴定方法

【例1】(2016·全国Ⅰ卷·40)某一质粒载体如图所示,外源DNA插入到Ampr或Tetr中会导致相应的基因失活(Ampr表示氨苄青霉素抗性基因,Tetr表示四环素抗性基因).有人将此质粒载体用BamHⅠ酶切后,与用BamHⅠ酶切获得的目的基因混合,加入DNA连接酶进行连接反应,用得到的混合物直接转化大肠杆菌.结果大肠杆菌有的未被转化,有的被转化.被转化的大肠杆菌有三种,分别是含有环状目的基因、含有质粒载体、含有插入了目的基因的重组质粒的大肠杆菌.回答下列问题:

(1)质粒载体作为基因工程的工具,应具备的基本条件有______________ (答出两点即可),而作为基因表达载体,除满足上述基本条件外,还需具有启动子和终止子.

(2)如果用含有氨苄青霉素的培养基进行筛选,在上述四种大肠杆菌细胞中,未被转化的和仅含环状目的基因的细胞是不能区分的,其原因是 ______________ ;并且 ______________ 和______________ 的细胞也是不能区分的,其原因是 ______________ .在上述筛选的基础上,若要筛选含有插入了目的基因的重组质粒的大肠杆菌单菌落,还需使用含有______________ 的固体培养基.

(3)基因工程中,某些噬菌体经改造后可以作为载体,其DNA复制所需的原料来自 ______________ .

【解析】(2)在含有氨苄青霉素的培养基上,只有具有Ampr的大肠杆菌才能够生长.而Ampr位于质粒上,故未被转化的和仅含环状目的基因的大肠杆菌细胞中均无Ampr,仅含有质粒载体的和含有插入了目的基因的重组质粒的大肠杆菌中均具有Ampr.目的基因的插入破坏了质粒载体的Tetr,故含有插入了目的基因的重组质粒的大肠杆菌不能在含有四环素的平板上生长,从而能与仅含有质粒载体的大肠杆菌区分开来. (3)噬菌体是病毒,无细胞结构,无法自主合成DNA,需借助受体细胞完成DNA的复制.

【答案】(1)能自我复制、具有标记基因(答出两点即可) (2)二者均不含有氨苄青霉素抗性基因,在该培养基上均不生长 含有质粒载体 含有插入了目的基因的重组质粒 二者均含有氨苄青霉素抗性基因,在该培养基上均能生长 四环素 (3)受體细胞

【易错提醒】(1)基因工程中有3种工具,但工具酶只有2种.其中,限制酶指一类酶,而不是一种酶.限制酶的化学本质为蛋白质,其作用的发挥需要适宜的理化条件,高温、强酸或强碱均易使之变性失活.

(2)在切割含目的基因的DNA分子时,需用限制酶切割两次此DNA分子,产生4个末端.

(3)限制性核酸内切酶和DNA连接酶的作用部位都是脱氧核苷酸之间形成的磷酸二酯键(不是氢键),只是一个切开,一个连接.限制酶不切割自身DNA的原因是原核生物中不存在该酶的识别序列或识别序列已经被修饰.

(4)限制酶切割位点所处的位置必须是在所需的标记基因之外,这样才能保证标记基因的完整性,有利于对目的基因的检测.

(5)为使目的基因与载体形成相同的DN段末端以方便连接,通常使用同一种限制酶将二者切割,但如果不同的限制酶切割DNA分子所产生的末端存在互补关系时,两末端也可连接.

4.利用PCR技术扩增目的基因

(1)原理:利用DNA双链复制的原理,在体外将基因的核苷酸序列不断地加以复制,使其数量呈指数形式增加.

(2)条件:

(3)解题规律总结

【例2】RT-PCR是将RNA逆转录(RT)和cDNA的聚合酶链式扩增反应相结合的技术,具体过程如下图所示.请分析回答:

(1)过程Ⅰ需要加入缓冲液、原料、______________ 、______________ 和引物A等.

(2)过程Ⅱ首先要将反应体系的温度升高到95 ℃,其目的是______________ ,该反应体系中所用的Taq酶至少应能耐受 ______________ ℃.

(3)过程Ⅱ拟对单链cDNA进行n次循环的扩增,理论上至少需要 ______________ 个引物B.

(4)利用RT-PCR技术获取的目的基因 ______________(填“能”或“不能”)在物种之间交流;该技术还可用于对某些微量RNA病毒的检测,可提高检测的灵敏度,原因是______________ .

(5)RT-PCR过程中主要借助对______________的控制,影响酶的活性,从而使得化学反应有序高效地进行.

【解析】(1)过程Ⅰ表示逆转录,除了需要缓冲液、原料和引物A之外,还需要RNA作为模板,逆转录酶进行催化.(2)过程Ⅱ先将反应体系的温度升高到95 ℃,使逆转录酶变性失活,mRNA-cDNA杂合双链解开,再在Taq酶的作用下合成双链DNA,由于该反应体系中温度升高到95 ℃,所以所用的Taq酶至少应能耐受95 ℃.(3)DNA复制时,子链的延伸需要引物,单链cDNA进行1次扩增得到双链DNA,需要0个引物A和1个引物B.若单链cDNA进行n次循环的扩增,双链DNA进行了(n-1)次扩增,则理论上至少需要(2n-1-1)个引物A和2n-1个引物B.(4)利用RT-PCR技术获取的目的基因能通过基因工程在物种之间交流;该技术增加了待测RNA逆转录产生的DNA的数量(或浓度),便于对某些微量RNA病毒进行检测,并可提高检测的灵敏度.(5)RT-PCR过程中主要借助对温度的控制,影响酶的活性,即高温变性→低温复性→中温延伸,从而使得化学反应有序高效地进行.

现代论文参考资料:

结论:现代生物科技为关于现代方面的论文题目、论文提纲、现代论文开题报告、文献综述、参考文献的相关大学硕士和本科毕业论文。

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