原创《大苞鞘石斛组织培养快繁》：关于免费石斛论文范文在这里免费下载与阅读,为您的石斛相关论文写作提供资料。
摘 要 为筛选出大苞鞘石斛组培快繁体系各阶段最适培养基配方,以大苞鞘石斛无菌苗茎段为外植体,通过正交试验研究不同因素对大苞鞘石斛植株再生的影响.结果表明：拟原球茎诱导最适培养基为1/2MS+2,4-D 0.2 mg/L+蔗糖30 g/L,诱导出的拟原球茎直径1.5 mm时将其从茎段上剥离,并接入原培养基继续诱导15～20 d；拟原球茎增殖最适培养基为1/2MS+NAA 1 mg/L+蔗糖30 g/L+椰乳10%,继代周期25～30 d；拟原球茎分化最适培养基为1/2MS+NAA 0.5 mg/L+蔗糖30 g/L+椰乳10%,分化培养需40 d；将分化的无菌苗继代于花宝2号3 g/L+蛋白胨2 g/L+IBA 1 mg/L+蔗糖30 g/L+椰乳10%生根诱导效果最好,培养45 d；生根壮苗最佳培养基为花宝1号3 g/L+蛋白胨2 g/L+蔗糖30 g/L+活性炭1 g/L,培养50 d.
关键词 大苞鞘石斛；组织培养；再生体系；拟原球茎
中图分类号 Q943.1 文献标识码 A
Abstract In order to study the effects of different factors on the tissue culture and plant regeneration of Dendrobium wardianum, three kinds of factors of three levels were used by an orthogonal design. The stem segments of D. wardianum were used as the explants for tissue culture. Results showed that the optimum PLBs induction medium was 1/2MS+2,4-D 0.2 mg/L+Sugar 30 g/L. When the shoot bud diameter reached to 1.5 mm, it must be detached and tranerred to the same media for 15-20 days. The optimum medium for PLBs proliferation was 1/2MS+NAA 1 mg/L+Sugar 30 g/L+CW 10% and the appropriate subculture cycle was about 25 to 30 days. The optimum PLBs differentiation medium was 1/2MS+NAA 0.5 mg/L+Sugar 30 g/L+CW 10%. The aseptic seedling which obtained from the former culture stage was cultured on the root induction media of Hyponex No.2 3 g/L+Peptone 2 g/L+IBA 1 mg/L+Sugar 30 g/L+CW 10% for 45 days. The optimal medium of strong plantlets and rootage was Hyponex No.1 3 g/L+Peptone 2 g/L+Sugar 30 g/L+Activated carbon 1 g/L.
Key words Dendrobium wardianum； tissue culture； regeneration system； PLBs
doi 10.3969/j.issn.1000-2561.2017.04.011
大苞鞘石斛（Dendrobium wardianum L.）又名騰冲石斛,药用商品名为扁黄草[1],含dendrowardine等生物碱[2]、多糖[3]、氨基酸及微量元素等活性成分[4-5],产于中国云南高海拔地区,常附生于树干上,对生境要求苛刻,自然状态下繁育率极低,加之常被作为观赏植物和中药材使用,因此被盗挖者过度采集,野生资源数量已非常稀少.针对该现状,对大苞鞘石斛种质资源的保护和研究逐渐引起了各界学者的重视,研究重点主要集中在组织培养等人工快速繁育技术的探索,通过该技术可加速种群扩繁与品种改良,Luan等[6]发现1/2MS培养基中添加萘乙酸（NAA）0.5 mg/L、椰乳20%、蔗糖30 mg/L可作为大苞鞘石斛无菌播种培养基；张小娟等[7]认为大苞鞘石斛拟原球茎可在MS（或B5）+ NAA 0.5 mg/L+6-苄基腺嘌呤（6-BA）0.2 mg/L+香蕉2.5%+椰乳2.5%+蔗糖25 g/L中进行悬浮培养；吴元玲等[8]、刘晓东等[9]对大苞鞘石斛拟原球茎超低温保存技术体系进行了研究与探讨；Sharma等[10]将大苞鞘石斛拟原球茎制作为人工种子且可在MS培养基上全部萌发；陈娜[11]、卓孝康等[12],初步探讨了大苞鞘石斛快繁体系的构建,为实现大苞鞘石斛种质资源的保护及再生奠定了基础.
目前,对大苞鞘石斛无菌播种技术研究较为成熟,但通过外植体诱导拟原球茎的途径建立快繁体系的研究甚少.通过大苞鞘石斛离体器官诱导拟原球茎,再利用拟原球茎的增殖分化培养获得大量幼苗,这种快繁方法可建立高效的快繁体系,对推进大苞鞘石斛工厂化育苗、遗传学和细胞学研究具有重要意义.基于此,本试验以大苞鞘石斛无菌苗茎段为外植体,通过正交试验设计,研究不同因素对大苞鞘石斛拟原球茎诱导、增殖与分化、生根诱导、生根壮苗等培养阶段的影响,以期筛选出适宜的快繁方案,为大苞鞘石斛种质资源的保育和开发提供科学依据.
1 材料与方法
1.1 材料
石斛论文参考资料：
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