原创《猪胸膜肺炎放线杆菌分离鉴定》：此文是一篇胸膜论文范文,为你的毕业论文写作提供有价值的参考。
摘 要：从本地疑似感染猪传染性胸膜肺炎病猪处进行材料收集,然后在巧克力琼脂平板上进行分离培养,最后得到三株细菌,将其分别命名为X-1、X-2、X-3.对相应的细菌依次进行生化特征检测、卫星生长现象分析、尿素酶实验鉴定、CAMP试验,其均表现出猪胸膜肺炎放线杆菌的典型症状.药敏试验结果为分离菌株对硫酸慶大霉素、四环素、氨苄西林、诺氟沙星具有高度敏感性.
关键词：猪传染性胸膜肺炎；猪胸膜肺炎放线杆菌；分离鉴定
猪传染性胸膜肺炎具有一定的散发性,常发生于仔猪断奶期间,会降低仔猪免疫力,进而导致仔猪败血症等病症,极大地增加了仔猪死亡率.对于成年种猪而言,其在感染猪胸膜肺炎放线杆菌之后会表现出关节炎、肺炎、体温上升、食欲下降等情况,甚至引发心内膜炎、肾炎等其他病症,甚至死亡.
一、材料和方法
1.材料制作
本文所使用的巧克力琼脂平板、麦康凯琼脂平板、鲜血琼脂平板、普通琼脂平板均为实验室自行制作；而药敏纸片、烟酰胺腺嘌呤二核苷酸均来自杭州某公司.肺脏病变组织及扁桃体样本采自某规模养猪场,此规模养猪场内病猪具有典型呼吸道疾病病症.实验动物为18g左右的小白鼠,均采购于当地实验动物机构.
2.方法实施
本次实验主要包括细菌分离培养、细菌鉴定两个环节.其中细菌分离培养需要将肺门淋巴结、肺组织、气管等组织器官无菌取样,并依次接种在所制作的巧克力琼脂平板上,在接种完毕之后利用鸡表皮葡萄球菌进行十字化线,最后在8%二氧化碳培养箱内培养, 36.5℃,培养36小时.
细菌鉴定工作首先选择巧克力琼脂平板上的单一可疑菌落,在依次进行涂片、革兰氏染色后进行镜检观察细菌状态；其次依次将所得到的细菌接种在鲜血琼脂平板、普通琼脂平板、麦康凯琼脂平板上,在36.5℃的二氧化碳培养箱内培养36小时；再次将1%血红素作为X因子、1%NAD作为Y因子,进行无菌涂片工作并将其涂布在普通培养基培养；最后依照相关规定对其进行尿素酶、卫星现象、糖发酵等生化特性检验.然后利用改良后的培养菌液进行动物回归试验.
二、结果分析
1.症状及分离结果
养猪场内病猪均出现典型的呼吸道症状,并伴随有体温升高、消瘦、咳嗽等现象,同时解剖检验发现个别样本病猪出现肺脏、胸腔粘连出血情况,且肺脏内部具有纤维素性物质渗出.细菌分离培养过程中均出现相同症状的β-溶血性细菌.
2.分离菌株染色及培养特性
革兰染色、镜检过程中观察到分离菌株为杆状、两端椭圆、有短连、双连、单一等不同的活动形式,极少部分细菌成长丝形状.通过分离菌株在普通琼脂、巧克力琼脂、鲜血等培养基内生长的情况对 析发现其为兼性厌氧菌.其中分离菌株在巧克力琼脂及鲜血琼脂培养基上呈现β-溶血性,且具有良好的生长状态；分离菌株在巧克力琼脂平板生长菌落成直径为0.9毫米的半透明状圆形,该菌株整体呈碧绿色,且菌落边缘较整齐,镜检后得出其为革兰氏阴性球杆菌；分离菌株在普通琼脂培养基上逐渐形成部分隆起、具有一定湿润度的灰白状菌落,菌落整体呈直径为0.6毫米左右的圆形.在初次分离后分离菌落在鲜血培养基内生长态势较好,且由以往的嵌入式生长转化为缓慢隆起状生长.在化有鸡表皮葡萄杆菌交叉接种后,可得出分离菌株在相应的巧克力琼脂培养基内呈现卫星现象,随后综合采用Y因子、X因子滤片培养后得出Y因子为此菌株生长必备条件.
3.生化试验及药物敏感性试验
经过分离菌株糖发酵实验得出分离菌株可发酵甘露醇、乳糖、葡*、麦芽糖、阿拉伯糖等糖类；而在尿素酶实验中得出分离菌株呈阳性反应.在药物敏感性实验中得出分离菌株均对四环素、诺氟沙星、氨苄西林等多西环素程序高度敏感性.此外在动物回归实验中发现在感染分离菌株后,小鼠均在24小时内死亡,而通过在死亡小白鼠体内分离到相同生长特性的菌株后灭活培养,然后对照组部分小白鼠接种灭活疫苗之后其呼吸道症状疫病逐渐减轻,随后在一段时期连续接种之后发现其抗原水平明显下降.
通过对某地规模养猪场收集的病猪样本进行细菌分离培养,将相关试样可得所分离得到的细菌培养性质和猪胸膜肺炎放线杆菌具有一致的生化特性.然后结合病菌致病性、流行病理论等因素可得出该分离均为猪胸膜肺炎放线杆菌,猪胸膜肺炎放线杆菌血清型较复杂,对于血清型交叉防疫工作进行提出了一定的困难,在实验结束后中对病猪肺脏纤维性渗出液进行了进一步分离培养实验,然后得出其内部含有多种病菌,如化脓棒状杆菌、大肠杆菌、副猪嗜血杆菌等,这些病菌不仅可以引起猪纤维素性胸膜炎,甚至会导致猪心包炎等病症的发生,而本文经过动物回归试验有针对性的制备了相关的疫苗接种措施,取得了良好的实验效果.
三、结语
综上所述,猪胸膜肺炎放线杆菌在感染猪后会直接导致猪传染性胸膜肺炎的产生,猪胸膜肺炎是一种严重的呼吸道疾病,不仅传染速率较快,而且感染会在较短的时间内促使仔猪死亡,再加上其和猪链球菌、猪瘟等病菌的联合作用,促使养殖场内猪的死亡率极大提升,对规模养猪行业造成了极大的经济损害,因此在种猪发病之初应及时送交相关检测机构鉴别分析,在确定病症的第一时间进行防疫治疗,降低猪胸膜肺炎放线杆菌的危害程度.
参考文献：
[1]张飞, 郑培, 曹剑,等. 猪胸膜肺炎放线杆菌的分离鉴定及致病性研究[J]. 黑龙江畜牧兽医, 2016（3）：151-154.
[2]车勇良, 陈如敬, 吴学敏,等. 猪胸膜肺炎放线杆菌的分离鉴定及药敏试验[J]. 养猪, 2016（6）：102-104.
胸膜论文参考资料：
结论：猪胸膜肺炎放线杆菌分离鉴定为大学硕士与本科胸膜毕业论文开题报告范文和相关优秀学术职称论文参考文献资料下载，关于免费教你怎么写胸膜贴方面论文范文。
