原创《烟青虫初孵幼虫高效快速收集方法》：这是一篇与烟青虫论文范文相关的免费优秀学术论文范文资料,为你的论文写作提供参考。
摘 要：比较了常用的烟青虫人工收集方法和新研发的烟青虫初孵幼虫快速收集方法的效果.试验结果表明,和人工收集方法相比,快速收集方法获得初孵幼虫所用时间少,收集的初孵幼虫存活率搞,达96.33%,且收集的幼虫发育更加整齐,雌、雄蛹单头质量（雌蛹295.33 mg,雄蛹284.66 mg）略大；还可节省大量人力,避免了人工挑虫对初孵幼虫的伤害,保障了烟青虫实验种群的大量优质扩繁.
关键词：烟青虫；初孵幼虫；快速收集法
中图分类号：S436.412.2+1 文献标识码：A 文章编号：1001-3547（2016）20-0083-04
烟青虫（Helicoverpa assulta）又称烟草夜蛾,属鳞翅目（Lepidoptera）夜蛾科.烟青虫在田间主要为害烟草和辣椒,为害辣椒时,以幼虫蛀食辣椒的叶片和花果,常年蛀果率为20%～30%,严重为害时,蛀果率高达30%～50%[1,2],经济损失严重；幼虫可钻入果内,啃食果皮、胎座,并在果内缀丝,排留大量粪便,致使果实不能食用,降低商品价值.
为了降低田间烟青虫为害,为高效防控烟青虫提供科学基础和理论指导,实验室内需要开展针对烟青虫生物学和生态学研究、对化学药剂的敏感度及其变异测定及毒理学参数等试验,因此需要室内继代饲养和繁育烟青虫试虫种群,而抗药性研究中还需要长期保存敏感和抗性或亚致死处理种群
等[3].目前采用人工饲料进行烟青虫室内大规模繁育和继代保种技术已经成功实现,并进一步改进[4],节约了大量的人力和物力.但是在烟青虫的种群扩繁过程中,其成虫通常在纱布上产卵,当卵孵化后,需要用细小毛笔将初孵幼虫非常小心地从纱布上挑取到人工饲料上饲养,这个过程中存在较多的问题,一是人工挑虫要特别小心,且耗时较长；二是即使非常小心,用毛笔挑取也很容易伤害或者致死初孵幼虫,降低后代饲养数量；三是如果卵在夜晚孵化,则无法及时挑取初孵幼虫到人工饲料上,而幼虫孵化后6 h内接触不到饲料即饿死.因此,如何自动无伤害地收集初孵幼虫一直是烟青虫乃至其他鳞翅目昆虫种群扩繁的制约因子之一.
在实验室饲养烟青虫时,常将装有卵布的塑料袋放置在实验台上,发现孵化后的幼虫清晨全部集聚在朝向窗户一侧,由此推测烟青虫初孵幼虫的趋光性较强.基于此,拟设置黑暗的卵孵化环境,正常环境的装有人工饲料的塑料盒作为幼虫收集盒,二者之间采用玻璃管相通,从收集时间、幼虫存活率和烟青虫蛹质量3个指标研究比较了该方法和常规人工收集方法的不同、优势以及是否适合用于烟青虫初孵化幼虫的收集.
1 材料和方法
1.1 试虫及人工饲料制作
试验用虫为采集自烟草田的烟青虫幼虫,室内在人工饲料上饲养超过3代.人工饲料的配方参照董钧锋等[4]的方法,具体成分及用量见表1.
其中,大豆粉在用前经高压灭菌锅灭菌处理30 min,蒸熟后自然晾干,用粉碎机再次粉碎备用.麦胚粉制作方法：将小麦粒洗干净,铺于玻璃槽内薄薄一层,每隔12 h洒水1次,保持小麦潮湿,当小麦根长超过种子长度时,再次洗净后放入电热恒温鼓风干燥箱中60℃干燥,最后加工成粉末备用.
人工饲料的具体制作方法如下：按表1所示份量,分别称取各组分.先将琼脂粉倒入不锈钢锅中,然后加入500 mL蒸馏水并在电磁炉上加热,同时不断搅拌,以确保琼脂粉充分溶解.琼脂粉煮沸3次后倒入九阳料理机中,加入称量过的麦胚粉、辣椒粉、麦麸、酵母粉、熟大豆粉及亚油酸,搅拌1 min.搅拌均匀后放在超净工作台内吹风辅助降温,待温度降到50～60℃时,加入山梨酸、尼泊金、抗坏血酸等再次搅拌1 min,最后将搅匀的饲料倒入直径
18 cm的灭菌玻璃培养皿中,置于超净工作台中冷却凝固,然后放入4℃冰箱中备用.
1.2 烟青虫饲养过程
试虫在养虫室内不接触药剂的情况下一直饲养在人工饲料上.养虫室室内温度（27±2）°C,湿度（60±10）%,光暗周期比为L/D等于16 h/8 h.具体饲养过程如下.
①带卵纱布消毒 将带卵纱布放入500 mL烧杯中,加入4%甲醛溶液浸泡10～12 min,清水漂洗2～3次,置于超净工作台内微风吹干表面水分后放入保鲜袋中,然后放入光照恒温培养箱中等待孵化.
②幼虫饲养 初孵幼虫群体饲养,卵孵化4 h内,用软毛笔将初孵幼虫小心接入灭菌的装有足够人工饲料的指形管（平底）内,每管接5头.用灭菌的脱脂棉塞住指形管,幼虫进入3龄后分管饲养,直至幼虫在试管中化蛹,饲料视情况更换.
③蛹 老熟幼虫化蛹后第3 天,将健康蛹从指形管内取出来,并将雌、雄蛹分别放入标记过的塑料培养皿中（直径90 mm）.随后,放进500 mL烧杯中,加入4%甲醛溶液浸泡10～12 min,用自来水冲洗并晾干后,按照雌雄分别放入羽化笼内.
④成虫 成虫羽化后转移到交配笼中,并放入浸蘸10%蜂蜜水的脱脂棉供其补充营养.成虫开始在纱布上产卵后,每天更换卵布.
1.3 烟青虫初孵幼虫收集
①常规人工收集法 带卵纱布上出现初孵幼虫后,在卵孵化4 h内,用软毛笔将初孵幼虫人工接入养虫盒内,养虫盒内加入足够的人工饲料,每盒接100头进行群体饲养.该部分由2位测试者（一位是在实验室工作超过2 a的熟练工人,另一位是在实验室工作不超过半年的非熟练工人）分别采用毛笔人工收集幼虫,再转移到人工饲料上.每个测试处理重复3次.
②快速收集法 用1个四周包上黑布的黑色塑料盒子作孵化盒,将消毒后的带卵纱布放入孵化盒中；设置第二个装有人工饲料的幼虫收集盒,孵化盒和幼虫收集盒分别在接近底部的侧面部位开1个圆孔,2个盒子之间用一根棕色玻璃管连接,初孵幼虫白天基于趋光性从玻璃管中间自行爬到幼虫收集盒的人工饲料上去取食；夜间在幼虫收集盒旁边放置一盏打开的LED台灯,借助灯光诱导夜间孵化幼虫爬行到幼虫收集盒中,每个收集盒中初孵幼虫数量达到100头左右时及时更换另外一个新的幼虫收集盒.该处理重复3次.
烟青虫论文参考资料：
结论：烟青虫初孵幼虫高效快速收集方法为关于对不知道怎么写烟青虫论文范文课题研究的大学硕士、相关本科毕业论文防治烟青虫的农药论文开题报告范文和文献综述及职称论文的作为参考文献资料下载。
