原创《青枯雷尔氏菌拮抗放线菌筛选其抗菌活性物质分离》：本论文为免费优秀的关于放线菌论文范文资料，可用于相关论文写作参考。
摘 要：烟草青枯病是由青枯雷尔氏菌引起的土传性病害.从健康土壤中分离到对青枯雷尔氏菌具有明显拮抗作用的放线菌LC-7,经初步鉴定为链霉菌属（Streptomyces sp.）.链霉菌LC-7的发酵液用氯仿、正丁醇萃取后,通过捷克八溶剂系统分析,判定该抗菌物质为碱性水溶性抗生素.抗菌物质进一步采用离子交换树脂纯化,并经醇沉后,获得抗生素的结晶,再用HPLC进一步纯化后并进行质谱分析可得出,LC-7所产抗菌活性物质为一种新的氨基糖苷类抗生素,其分子量为365.1.田间试验表明,链霉菌LC-7对烟草青枯病具有显著的防治效果,防效为85.48%.
关键词：放线菌；青枯雷尔氏菌；氨基糖苷类抗生素；分离纯化
中图分类号：S435.72 文章编号：1007-5119（2017）02-0069-06 DOI：10.13496/j.issn.1007-5119.2017.02.012
The Selection of Antagonistic Actinomycetes against Ralstonia solanacearum and Purification of Antibacterial Substance
LUO Wenjian1, LIU Yuhong1, SHI Heli2, TAN Jun2, WANG Rui2, ZHAO Xiuyun1, XIANG Bikun2*
（1. College of Life Science and Technology, Huazhong Agricultural University, Wuhan 430070, China； 2. Enshi Tobacco Company of Hubei Province, Enshi, Hubei 445000, China）
Abstract： Tobacco bacterial wilt is a soil-borne disease caused by Ralstonia solanaceanm. A strain of Actinomycete LC-7 with obvious antagonistic activities against R. solanaceanm was isolated from healthy soils and identified as Streptomyces sp. The fermentation broth of Streptomyces sp. LC-7 was extracted with chloroform and n-butanol. The analysis through the Czech eight solvent systems revealed that the antibacterial substance was an alkaline water-soluble antibiotic. The antibacterial material was purified by exchange column, and precipitated with alcohol to obtain the crystal. The crystal was further purified by HPLC and analyzed by mass spectrometry. The results showed that the antimicrobial active substance was a new aminoglycoside antibiotic with a molecular weight of 365.1. In the field experiment, Streptomyces sp. LC-7 had significant control effect on tobacco bacterial wilt. The control efficacy was 85.48%.
Keywords： actinomycetes； Ralstonia solanaceanm； aminoglycoside antibiotics； isolation and purification
烟草青枯病是细菌性土传性病害,由青枯雷尔氏菌（Ralstonia solanaceanm）引起.其寄主及危害范围广泛,造成了巨大的经济损失[1].筛选有效的生防菌对青枯病进行防治是烟草生产的迫切需要.近年来有许多拮抗细菌如放线菌、芽胞杆菌、假單胞杆菌等被应用到烟田中防治青枯病[2],能有效控制植物病害的放线菌主要是链霉菌属[3].放线菌一方面通过寄生于植物组织内诱导产生抗生素对致病菌发挥生防作用[4],另一方面可以通过抗生作用[5]、竞争作用、重寄生和捕食作用[6]降低病原菌的致病性和侵染性,从而达到防治的效果.本研究拟从健康烟田土壤中筛选出对青枯病菌具有良好抗性的放线菌,并选取抑菌活性最高的菌株进行鉴定,对其所产生的活性物质进行分离、纯化和鉴定,为开发新型高效绿色生防菌剂及抗生素提供技术和物质支持,以丰富烟草青枯病生物防治的药剂和方
1 材料和方法
1.1 供试病原菌
烟草青枯雷尔氏菌（Ralstonia solanacerum）,从发病烟草植株上分离,为本实验室保存.
1.2 土壤样品的采集
采集地：湖北恩施州健康烟田.
1.3 放线菌的分离和纯化
1.3.1 土壤放线菌的分离 从恩施州健康烟田中采集烟草根际土壤,称取5 g土样放于含15～20个小玻璃珠无菌三角瓶中,加入45 mL无菌水后室温下振荡20 min,将所得土壤浸液按梯度稀释,最后取100 ?L浓度为10-2～10-4的土壤浸液,均匀地涂布于含有50 ?g/mL重铬酸钾的高氏一号培养基平板上,28 ℃下培养5 d.挑取平板上的单菌落保存.
放线菌论文参考资料：
结论：青枯雷尔氏菌拮抗放线菌筛选其抗菌活性物质分离为关于本文可作为相关专业放线菌论文写作研究的大学硕士与本科毕业论文放线菌的味道论文开题报告范文和职称论文参考文献资料。
