关于分子标记论文范文资料 与洋葱细胞质雄性不育基因分子标记开发有关论文参考文献

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摘 要：

根据细香葱orfA501开发的特异引物,以洋葱细胞质雄性不育系为试材进行PCR扩增,对获得的片段进行回收测序,根据测序结果设计引物进行染色体步移,获得部分侧翼序列,开发了鉴定洋葱细胞质基因型的SCAR标记,命名为OC2175.该标记在洋葱不育系中扩增出一条2 175 bp的特异条带和1 053 bp的条带,而保持系中仅扩增出1 053 bp的条带.对17组不同遗传背景的不育系及其相应的保持系进行验证,该SCAR标记的鉴定结果和田间表型判断结果完全吻合.

关键词：洋葱;细胞质雄性不育;分子标记

中图分类号：S633.203.6 文献标识号：A 文章编号：1001-4942（2015）06-0001-04

Development of a Molecular Marker Identifying

Cytoplasmic Male Sterility Gene in Onion（Allium cepa L.）

Li Yongbo1,2,Liu Bingjiang2,Huo Yumeng2,Miao Jun2,Yang Jianping1,Wu Xiong2,Yang Yanyan2*

（1. College of Horticulture Science and Engineering of Shandong Agricultural University, Taian 271018, China;

2. Vegetable Research Institute of Shandong Academy of Agricultural Sciences,Jinan 250100,China）

Abstract The specific primers of orfA501 in chives and cytoplasmic male sterile line of onion were used to PCR amplification. The amplified fragment was extracted and sequenced. The primers were designed according to the obtained sequence for genome walking, and partial flanking sequence was obtained. Then a SCAR marker was developed and named as OC2175. With this marker, a special fragment of 2 175 bp could be obtained from the male sterile lines and a 1 053 bp fragment was amplified from both （s）-cytoplasm and （N）-cytoplasm. Seventeen pairs of male sterile lines and their corresponding maintainer lines with different genetic backgrounds were used to verify this SCAR marker. The results indicated that the SCAR marker was perfectly suitable for distinguishing the cytoplasm types S or N in onion.

Key words Onion; Cytoplasmic male sterility; Molecular marker

洋葱（Allium cepa L.）,又称圆葱、葱头,百合科葱属,已有5 000多年的栽培历史.1936年美国的Jones和Emsweller 首次在“Italian Red”品种中发现雄性不育株[1],1943年Jones和Clarke又发现了雄性不育系[2].随后洋葱成为世界上最早利用 优势的蔬菜作物之一.洋葱是两年生植物,其育种年限是白菜、萝卜等蔬菜的2～4倍,和传统的测交-回交、自交等方法相比,分子标记技术直接以DNA形式出现,在植物体的各个组织、各发育时期均可检测,不受季节、环境的限制,可大大缩短不育系和保持系的选育年限,减少工作量,加快育种进程.

国内外关于洋葱细胞质雄性不育的研究报道较少,Havey[3]利用RFLP分子标记手段找出了洋葱雄性保持系和不育系线粒体基因组之间的差异.Engelke等[4,5]得到了鉴定洋葱S型、N型和T型细胞质的分子标记.Sato[6]利用CMS特殊线粒体核苷酸序列的PCR扩增来鉴定洋葱细胞质基因型.李园园等[8]对洋葱细胞质雄性不育系及其保持系进行RAPD分析,成功获得了一个RAPD标记.Kim等[7]在S型和T型细胞质中发现了一个嵌合的开放阅读框orf725,并且开发了一个区分三种洋葱细胞质类型的分子标记.

由于细胞质中的DNA序列易产生缺失、插入等变异现象,再加上遗传背景、人工选择和自然选择的差异等,上述很多研究,存在可操作性差、重复性低、不稳定等缺点.本研究旨在结合TAIL-PCR[9]和SCAR标记方法开发一种鉴定洋葱细胞质育性的分子标记,以准确区分洋葱S型和N型细胞质,避免选择的盲目性,提高选择效率,加快洋葱细胞质雄性不育系及保持系的选育进程.

1 材料和方法

1.1 试验材料

试验材料为本课题组选育的17组洋葱细胞质雄性不育系及其相应的保持系,于2011年9月10日播种于山东省农业科学院蔬菜花卉研究所实验基地,11月初定植,并提取洋葱基因组总DNA,2013年6月田间检测花粉育性.

分子标记论文参考资料：

分子生物学论文

医学分子生物学杂志

结论：洋葱细胞质雄性不育基因分子标记开发为关于分子标记方面的的相关大学硕士和相关本科毕业论文以及相关分子标记的原理论文开题报告范文和职称论文写作参考文献资料下载。