原创《基于葡萄柚叶片离体再生体系》：本文是一篇关于葡萄柚论文范文，可作为相关选题参考,和写作参考文献。
摘 要 以10个葡萄柚品种种子萌发的无菌苗叶片为外植体,研究葡萄柚的离体再生体系.结果表明：在MS+1.0 mg/L 2,4-D+6%蔗糖培养基上,8个葡萄柚品种能诱导出愈伤组织,其中“星路比”品种诱导率最高为46.67%,将诱导的愈伤组织转移至相同培养基中可继代增殖；“帕利斯”、“星路比”、“泰国种”3个品种的叶愈伤组织接种于MS+3.0 mg/L 6-BA分化培养基上可分化出丛生芽,这些丛生芽在MS+0.2 mg/L 6-BA培养基上平均可增殖4～6个芽；丛生芽在1/2 MS+1.0 mg/L IBA生根培养基上可诱导出不定根.炼苗后,田间移栽成活率为78.18%.为后续葡萄柚良种选育及遗传转化体系的建立奠定基础.
关键词 葡萄柚；再生植株；愈伤组织；不定芽
中图分类号 Q943.1 文献标识码 A
Abstract The leaves of aseptic seedlings from the seeds of ten grapefruit varieties as explants were used to establish the in vitro regeneration system of grapefruit. The results showed that the callus of eight grapefruit varieties were observed in the medium MS+1.0 mg/L 2,4-D+6% sugar, and “Star Ruby”had the highest callus induction frequency, which is 46.67%. The multiplication medium of the callus was the same medium. The medium of the differentiation of adventitious buds of three grapefruit varieties“Perlist”“Star Ruby”and “Thailand” was MS+3.0 mg/L 6-BA. The medium for multiplication of the regeneration buds was MS+0.2 mg/L 6-BA, and the rooting medium was 1/2 MS+1.0 mg/L IBA. The survival rate of regenerative plant was 78.18%. In order to provide useful references for the breeding and the application of genetic transformation technique in grapefruit.
Key words Citrus paradisi Macf.；Regenerative plant；Callus；Adventitious bud
doi 10.3969/j.issn.1000-2561.2015.03.007
葡萄柚（Citrus paradisi Macf.）是芸香科柑橘属亚热带常绿果树,为甜橙和柚的天然杂交种,是世界柑桔类四大类群之一[1],因果实悬挂成串,簇生如葡萄,故称葡萄柚[2].葡萄柚起源于西印度群岛的巴巴多斯,在欧美地区大量种植,中国种植较晚[3].葡萄柚的营养价值丰富、果实柔嫩、风味独特,既可鲜食,又可加工制成罐头、果汁及色拉等原料[4-6],越来越受到世界各国的生产者和消费者的喜爱,因此发展葡萄柚种植具有可观的前景[7].
葡萄柚主要通过接穗嫁接栽培[8],不仅费工费时,而且易造成品种退化,给葡萄柚的生产带来损失.通过建立高效的离体再生体系,能有效克服传统繁殖方式的弊端,为葡萄柚的原体苗木遗传育种、基因转化及品种改良提供重要基础.叶片是植物光合作用的重要器官,又是某些植物的繁殖器官,很多植物的叶片具有比较强的再生能力,能够产生再生植株,叶片离体培养在植物器官培养中占有一席之地,目前已从水稻、小麦、油菜、番茄、杨树、菊花、百合、猕猴桃、桃等百余种植物的叶片培养中获得了再生植株[9-10].周梦春等[11]用琯溪蜜柚、沙田柚和江津柚的叶片诱导出了愈伤组织.邓群仙[12]以酸柚、中江柚的叶片为外植体时,始终未能诱导出芽.在果树离体叶片培养中,对愈伤组织的诱导和生长影响效果比较显著的是2,4-D[13].黄涛等[14]通过研究沙田柚叶片离体再生的影响因素表明,2,4-D可诱导沙田柚叶片愈伤组织的形成.
云南省于2002年初次从美国引进9个葡萄柚品种（品系）,并相继开始了相关研究[15-17].目前,关于葡萄柚离体再生培养方面已有探索,以邓肯葡萄柚实生苗上胚轴为材料进行培养,成功获得了再生植株[18-19].但以葡萄柚叶片为外植体进行离体再生方面的研究国内尚未见系统报道.本试验拟采用10个葡萄柚品种的组培苗叶片为试材,对其进行离体再生培养,并为进一步的无性变异体筛选和采用基因工程进行遗传改良奠定良好基础.
1 材料和方法
1.1 材料
供试材料是从美国引进嫁接栽培在云南省西双版纳州普文镇试验林场的9个葡萄柚品种,分别为火焰（Flame）、矮化（Genetic Dwarf）、亨路比（Henderson Ruby）、哈路比（Hudson Foster）、帕利斯（Perlist）、瑞路比（Ray Ruby）、里德马叙（Reed Marsh）、里约红（Rio Red）、星路比（Star Ruby）,以及泰国种（Thailand）葡萄柚的种子,以其种子萌发的无菌苗为试验材料.
1.2 方法
葡萄柚论文参考资料：
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