原创《中国常用橡胶树品种鉴定方法》：该文是关于橡胶树论文范文，为你的论文写作提供相关论文资料参考。
摘 要 橡胶树（Hevea brasiliensis）产生的胶乳是天然橡胶的最重要来源,不同品种产生胶乳的能力不同,但不同的橡胶树品种形态差异小,难以区分.利用简单的方法区分不同的橡胶树品种具有重要的意义.以天然橡胶生物合成相关的7个基因家族中的目的基因及启动子序列为模板,设计基因特异的PCR引物16对,分别扩增21个橡胶树栽培品种的基因组DNA,扩增条带的多态性可将19个品种区分开（除了云研77-4和南华1号外）.再利用橡胶小粒子编码蛋白基因（SRPP2）特异的引物,扩增云研77-4和南华1号的SRPP2基因,PCR反应产物直接测序,通过单核苷酸水平上的差异可准确的将二者区分开.本研究通过简单的PCR扩增及其扩增产物的直接测序,建立了一种稳定性好、简单快速、经济高效的鉴定橡胶树品种的方法.
关键词 橡胶树；克隆；引物设计；品种鉴定；单核苷酸差异
中图分类号 S794.1 文献标识码 A
Abstract The latex of the rubber tree（Hevea brasiliensis） is the most important source of natural rubber. The ability of latex production and adaptability of different rubber tree clones varied greatly, however, it is difficult to distinguish clones based on morphological traits, which is an important task in field work. In this study, sixteen pairs of gene specific primers were designed basing on gene and promoter sequences of genes related to natural rubber biosynthesis, these primer pairs were used respectively to amplify the genomic DNA of 21 rubber tree clones widely grown in China. The results showed that banding profile of these primer pairs could distinguish the 19 rubber tree clones, except Yunyan77-4 and Nanhua1. PCR amplification products using gene（SRPP2 encoding small rubber particle protein）specific primers were used for sequencing analysis, these two clones could be distinguished based on single nucleotide differences. In this study, a simple, stable and cost effective method using PCR band profile and PCR product sequencing to identify rubber tree clones was established.
Key words Rubber tree；Clone；Primer design；Clone identification；Single nucleotide difference
doi 10.3969/j.issn.1000-2561.2016.08.001
橡胶树（Hevea brasiliensis）原产于巴西亚马逊河流域赤道气候带,为多年生乔木,是典型的热带雨林树种.天然橡胶是橡胶树的次生代谢物,具有耐高温和高弹性等突出优点,是世界性工业原料和重要的战略物资,具有极高的经济价值及应用前景.在2 000多种产胶植物中,橡胶树是唯一大规模商业化种植的产胶植物.近年来,随着世界对天然橡胶需求量的不断增加,橡胶树栽培面积也迅速扩大.中国是天然橡胶的消费和生产大国,自1906年起就开始种植橡胶树,但受自然条件限制,橡胶树仅分布在海南、广东、云南等地.
目前世界上栽培的橡胶树品种均来自魏克汉种质,并通过引种、杂交等育种手段,选育和推广了多个高产优质的橡胶树品种.中国在生产中也使用了大量的橡胶树品种,仅中国栽培的橡胶树就超过了20种,并且早在20世纪70年代引进的RRIM600仍然在广泛种植.为了加快品种的更新换代,了解不同橡胶树品种的分布,以及在进行野外调查时确定调查对象的遗传背景,需要简单、快速、准确的橡胶树品种鉴定方法.
植物品种鉴定方法主要包括形态学鉴定法、物理化学鉴定法、生化鉴定法和DNA分子标记指纹图谱鉴定法等[1].目前国内外品种鉴定仍以形态学鉴定为主,但形态标记的表现受环境影响较大、鉴定工作量大、周期长、受季节限制[2-3],并且橡胶树不同材料之间的差别较小,对普通的工作者而言,难以区分.近年来,分子标记方法（RFLP、AFLP、SSR、ISSR、SRAP、TRAP、SNP）的开发和利用在作物遗传多样性分析、遗传图谱构建、种质资源鉴定等方面的研究取得了一定的研究进展[4-5],这些技术可被用来有效的区分不同的品种,但这些技术的操作技术复杂,对DNA质量要求高,时间长,费用相对较高[6-7].因此,亟需开发稳定性好、简单快速、经济高效的橡胶树品种鉴定方法.
本研究以天然橡胶生物合成相关的7个基因家族中的部分目的基因及启动子序列为模板,设计16对特异性扩增引物,对中国热带农业科学院橡胶研究所国家橡胶树种质圃保存的且在中国生产上广泛利用的21份魏克汉种质进行PCR扩增,结合PCR产物测序,以期建立一种简单快速、稳定且经济高效的橡胶树品种鉴定方法.
橡胶树论文参考资料：
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