原创《3.6苄氨·赤霉酸可溶液剂高效液相色谱分析方法》：本论文可用于高效液相色谱论文范文参考下载，高效液相色谱相关论文写作参考研究。
摘 要：苄氨基嘌呤是通过人工方式制造出的细胞分裂素,其主要作用是促使细胞发生分裂,让果实成长到足够大,使果实的外观更加优美.此次研究当中使用反相高效液相色谱法,以CH4O+H2O作为流动相,研究中使用的主要设备C18色谱柱,搭配二极管阵列检测器共同发挥作用,在将波长设定为210nm,在此条件下对浓度为3.6%的苄氨·赤霉酸可溶液剂进行检测,对其中含有的苄氨基嘌呤和赤霉酸展开研究,在将二者分离之后,使用定量的方式展开探讨.通过实验的方式进行研究,对最终的结果进行准确程度以及精确程度方面的判定.
关键词：苄氨基嘌呤；赤霉酸；液相色谱分析方法
苄氨基嘌呤是使用人工方式合成,可以归入细胞分裂素一类,其能在使用之后促使细胞分离,让果实膨胀变大,对果实的观感改善也能够发挥一定作用.其可以压制减缓植物内部的叶绿素、蛋白质等物质的分解,将生长素以及无机盐等物质传输到有需求的位置,能够让芽获得良好的生长,还具备一定抗衰老功效,具有其他同类激素无法比拟的优势.赤霉酸中GA3属于最常出现的,而目前产量较低的GA4+GA7,其可以对种子实施刺激,促使其尽快发芽,进而对植物的生长起到积极的作用.以上两种植物发育调整用剂在农业果业等领域之中得到广泛应用.当前,将两者结合在一起形成复配制剂的研究较少,此次展开定量分析.
一、实验
1.试剂以及药物.甲醇：色谱表现较为纯正,水主要使用二次蒸馏水,磷酸经过研究证实纯度高,苄氨基嘌呤样本在98%及以上,有农业部专门部门供应.赤霉酸,此次研究使用GA4+GA7,样本在98%及以上,生产单位是陕西省韦尔奇公司生产,研究使用的3.6%苄氨·赤霉酸可溶液剂,主要由苄氨基嘌呤和赤霉酸各1.8%混合而成,供应公司如上.
2.实验设备.检测设备为高效液相色谱仪,具体型号为Waters2695,包含了二极管阵列检测器以及自动进样器,色谱工作站.色谱柱的型号为Eclipse XDS,其具体规格为150mm×4.6mm,材质为不锈钢C18柱.实验过程中还要使用到过滤设备,其滤膜孔径大致是0.46um.
3.具体操作情况.以CH4O+H2O作为流动相,也就是甲醇和水进行调和,将磷酸的pH控制在4.0,两者体积比例设定为60比40.流动速度为1.0mL/min.柱温度需要限定在30℃,实验中的波长需要设定在210nm,送入样本的体积为5.0uL.停留时长,苄氨基嘌呤大概是2.4min,赤霉酸GA4大致是5.8min,GA7则大致是7.1min.
上面各项数据属于标准参考系数,但并非固定不变,类似实验选用的仪器之间总会存在差异,可以根据实验的实际情况进行必要的调整,让实验顺利完成,获得较为理想的结果.
4.检测环节.（1）样本溶液配制.使用精密称重设备选择0.05g的苄氨基嘌呤样本,赤霉酸选取0.1g,两者共同称重都要精确到0.0002g,放在同一个实验瓶中,瓶子的容量为100mL,添加甲醇,以超声的方式进行溶解,将容量定位在规定的刻度之内,然后放置在固定位置,保留到一下实验环节之中使用.（2）试样溶液配制.选择1.5g试验样本,称重精确程度如上,也放在容量为100mL的瓶子之中,以后操作步骤如上个环节.（3）检测判定.色谱操作状况不变的情况下,等到设备基线处于平稳状态之后,不间断放入样本溶液,每个针对应的响应值变动限度在1.5%以下的时候,检测判定一定要严格按照标准次序,也就是样本、试样、试样、样本.（4）测算.对判定的2针试样溶液之中的苄氨基嘌呤极限面积实施平均,对样本溶液前后两针的苄氨基嘌呤也采取相同操作,赤霉酸也可以如此测定.然后测算其质量分数,公式如下：
对上式进行分析可知,A1表示样本溶液当中的赤霉酸的极限面积平均数,A2表示试验样本溶液当中的赤霉酸极限面积平均数,m1表示样本质量,㎡表示试样质量,P则表示相应的质量分数,以上指标同样可以用于苄氨基嘌呤之中.
二、结果和分析
1.色谱因素挑选.使用色谱仪收集数据,可以得到苄氨基嘌呤和赤霉酸的波长信息.通过观察可知苄氨基嘌呤获取波长的极限在211nm以及265nm旁边,赤霉素的相应数值为206nm左右,为了将溶液的影响控制在最低限度内,同时两者的波长,将波长定位在210nm.
对苄氨基嘌呤各个方面的特性进行研究,以赤霉酸测定规范为依据,将甲醇归为流动相之一,另外也将甲酸水溶液归入此列之中,将样品放在甲醇之中,苄氨基嘌呤可以独立区分出来,峰的外形失衡情况较轻.两种赤霉酸的组成部分也可以独立区分出来,但是会出现相反的峰形,基线容易失衡.使用微量磷酸,将溶液的PH值定位在4.0,两者的峰形都失衡较轻,基线处于稳定状态,相反峰形也未出现,需要停留时长短,操作效率较高.
2.研究方式的关联试验.将经过调整的最后样本溶液在固定的色谱情况下展开研究,放进样本的量为1、3、5、10和15,单位都是UL,以苄氨基嘌呤的称重作为变量,使用赤霉酸也可,极限面积作为因变量,可以得到相应的线性等式,然后确定和此有关的系数,当然,也可以同时判定出赤霉酸的线性等式以及各类系数.
3.精密度判定.实验的结果必须在精密程度上获得较好的表现,如此才能实验的各个环节才能具备实际意义.因此,在完成实验之后,需要使用相应的判定方式对试验结果的精密程度进行判定,具体情况如下.色谱情况不变,对每个样品单独检测5次,然后计算出相应的标准差异,分别是0.012和0.014,然后相应的变异系数也可以得到判定,分别是0.67%以及0.71%.通过对上述数据进行分析可知,本次实验结果的精密程度处于较高水平,能够满足实验在相关现实问题应对中的实际要求.
4.准确度判定.在试验当中,获得的各项数据的准确度十分重要,可以对实验的现实功能产生重要影响,将其准确程度控制在较高的范围之内,因此,实验完成后也要对准确程度进行判定.对已判定含量结果的样品之中放入存在称重差异的样本,色谱情况不变,可以测算出苄氨基嘌呤的均回收率是99.86%,赤霉酸则为99.75%.对上述数据进行分析可知,此次实验结果在准确程度方面表现较好,对实验发挥现实作用起到了较为积极的作用.
三、结论
经过上述实现可知,实验所使用的方法能够对3.6%苄氨·赤霉酸可溶液剂进行深入研究,能顺利判定其中的两种必要成分,分离过程顺利且得到较佳的结果,而且十分准确,精密程度也处于较高的水平,各个测算环节都能够很好地满足定量分析的标准,是一种效率较高、活得结果速度较快、而且分析结果精确度较好的方式.
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高效液相色谱论文参考资料：
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